本发明涉及一种耐有机溶剂糖苷酶产生菌及该菌产生的耐有机溶剂糖苷酶Fru6及其同源体和突变体,以及该耐有机溶剂糖苷酶Fru6在水相或者非水相中糖基化修饰黄酮类物质的应用和合成高品质寡糖的应用。该耐有机溶剂糖苷酶Fru6能耐受一定浓度的多种亲水性有机溶剂。本发明分离克隆到该菌所产耐有机溶剂的耐有机溶剂糖苷酶Fru6编码基因,它具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,其氨基酸序列示于SEQ ID NO:2。该耐有机溶剂糖苷酶Fru6/Fru6突变体具有强的转糖合成作用,故具有在水相或者非水相中糖基化修饰黄酮类化合物及合成寡糖等工业应用价值。
本发明提供一种具有有机溶剂耐受性的沙雷氏菌属菌株,命名为Serratiamarcescens MH6,其保藏登记号为:CCTCC M 208205。本发明还提供该菌株产生的耐有机溶剂蛋白酶,该耐有机溶剂蛋白酶具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,其编码基因具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明提供的菌株Serratia marcescens MH6是能够耐受有机溶剂的极端微生物,能够产生耐有机溶剂蛋白酶,丰富了极端微生物的种类和耐有机溶剂蛋白酶的来源。该蛋白酶较其它的天然蛋白酶具有良好的有机溶剂耐受性,有望应用于非水相中多肽的合成及关于其有机溶剂耐受机理的理论研究。
本发明的目的是提供一种耐有机溶剂脂肪酶的产生菌,以及用该产生菌制备而得的耐有机溶剂脂肪酶和该脂肪酶在有机相中催化合成生物柴油的应用。通过筛选获得菌株Pseudomonas aeruginosa LX1,其产生的耐有机溶剂LX1脂肪酶具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列,编码基因具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明还提供耐有机溶剂LX1脂肪酶在有机相酶催化反应中的应用,尤其是合成生物柴油的酯交换反应。所述的耐有机溶剂脂肪酶在有机溶剂叔丁醇体系或无溶剂中,催化底物大豆油和甲醇酯交换合成清洁能源生物柴油,转化率达80~90%。